第二天一早,温楚莹拿着图表冲进会议室。
“教授、张老师、师姐,我发现问题可能出在样本采集时间上!”
她把图表摊在桌上,
“你们看,下午 2 点采集的样本,环境温度 2c左右,ct 值波动最小;
我怀疑低温会抑制耐药基因的表达,导致检测时扩增效率不稳定。”
张老师凑过来看,手指点在图表上:
“这个规律…… 有点像我之前看过的一篇文献,
里面提到极端环境微生物有‘温度适应性表达’特性,低于 0c时,耐药基因的启动子活性会下降 50。
我当时觉得和咱们的样本关联不大,就没提。”
王教授的眼睛亮了:
“那咱们就做验证实验!今天分三个时间点采集:上午 10 点、下午 2 点、下午 4 点,
每个时间点采 3 份样本,统一在 4c条件下保存,然后同时检测,看数据差异。”
采集团队按照安排行动,下午五点,样本准时送到实验室。
温楚莹和李师姐立刻开始处理 —— 统一离心 10 分钟,加 5 甘油保存,然后同时加载到三台 pcr 仪上。
等待结果的四十分钟里,没人说话,大家都盯着仪器屏幕,连王教授都时不时看一眼手表。
“出来了!” 李师姐先喊出声。
屏幕上,下午 2 点采集的样本 ct 值分别是 285、287、286,波动只有 01;
下午 4 点的是 292、294、293,波动 01;
而上午 10 点的是 321、325、323,波动 04,且整体 ct 值偏高。
“真的是采集时间的问题!” 张老师激动地拍了下桌子,“楚莹,你立大功了!”
可温楚莹却没立刻松气:
“但上午的样本 ct 值还是偏高,要是采集团队遇到特殊情况,只能上午采集怎么办?咱们得想办法让上午的样本也能稳定检测。”
王教授点头:“说得对。张老师,你查文献看看有没有能激活低温下耐药基因表达的试剂;
楚莹,你试试在样本处理时加入不同浓度的诱导剂,比如 iptg,看看能不能改善;
李黎,你负责优化样本保存的温度梯度。”
接下来的两天,团队又进入新的攻坚。
可新的问题又出现了 —— 加入 iptg 后,样本的非特异性扩增增加,出现了杂峰。
“怎么办?杂峰要是不消除,会影响结果判断。” 李师姐看着屏幕上的杂峰,皱起眉。
温楚莹盯着杂峰的位置,突然想起在学校做竞赛时,林导师教过的 “引物特异性优化法”:
“咱们调整一下引物的退火温度,之前用的是 58c,试试 59c和 60c,看看杂峰会不会消失。”
她做了三个温度梯度的实验,当退火温度升到 595c时,杂峰果然消失了,ct 值稳定在 293±02。
“成功了!” 她忍不住欢呼,小初砚在意识里放起了虚拟烟花:“宿主太棒啦!终于解决了!”
解决了采集时间的问题,团队开始优化检测效率。
原来的检测方法需要 6 小时,王教授希望能缩短到 2 小时以内,方便应急使用。
温楚莹想起在学校研究的 “双段控温法”—— 将退火和延伸阶段的温度整合,减少升温降温的时间。
她先做了温度梯度实验:退火温度 59c、延伸温度 72c,之前是分两步各 30 秒,
“是不是温度太高了?”过来查看,“65c可能让引物结合不充分,试试 63c。”
小初砚在意识里帮她模拟不同的温度和时间组合:
她按照小初砚的建议调整,这次的扩增效率达到了 92,ct 值波动 02,检测时间缩短到 18 小时。
“再优化一下,把预变性时间从 2 分钟降到 1 分钟,看看能不能再快一点。” 王教授建议。
温楚莹试了预变性 1 分钟,结果扩增效率没下降,检测时间最终定格在 15 小时。
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当最后一组数据出来时,实验室里响起了掌声,ct 值 284±01,扩增效率 93,非特异性扩增为零,完全符合应急检测的要求。
“太好了!” 李黎抱了抱温楚莹,眼眶红红的,“这一周熬的夜总算没白费!”
张老师拿着数据报告,笑着说:“我这就整理数据,申请专利!
这个‘极端环境微生物快速检测技术’,不仅效率高,还解决了低温采集样本的稳定性问题,在国防微生物防御里能派大用场。”
王教授看着大家,语气欣慰:“这不是一个人的功劳,是咱们团队一起努力的结果。
楚莹发现了关键问题,张老师提供了文献支持,李师姐做了大量重复实验,每个人都没放弃。”
深夜,温楚莹坐在操作台前,翻看手机里学生们的消息。
李萌发来一张照片,是班里同学做实验的场景,每个人的实验台上都放着她之前发的 “样本保存笔记” 复印件,
配文:“学姐,我们今天做了冻土样本的模拟实验,按照你的笔记操作,没一个污染的!你什么时候回来呀?”
她笑着回复:“快了,等我们的研究成果出来,就回去给你们讲极端环境里的耐药菌,它们在显微镜下像小雪花一样,特别可爱。”
放下手机,她打开相册,里面存着这一周的实验照片:
第一次发现数据规律时画的图表,加 iptg 后出现的杂峰,最后稳定的扩增曲线,还有团队一起熬夜吃泡面的合影。
小初砚的声音轻轻响起:“宿主,你看,做研究虽然难,但每次突破都好有成就感,对不对?”
温楚莹点点头:“对,而且我知道,这个技术以后能保护更多人,就像之前李老师说的,学习是为了踩实每一步,研究就是为了给国家添砖加瓦。”
窗外的月光透过玻璃,落在操作台上的实验记录册上,每一页的数据都工工整整,边角处的便签写满了思考和调整。
温楚莹知道,这段攻坚的日子,会比任何荣誉都珍贵。
它不仅教会她如何面对科研的瓶颈,更让她明白,科学研究从来不是一个人的孤军奋战,
是团队的信任、彼此的支撑,还有那份对 “有用” 的坚守,才能让每一次失败都成为走向成功的阶梯。
她拿起笔,在记录册的最后一页写下:“202x 年 10 月 28 日,极端环境微生物快速检测技术优化完成,检测时间 15 小时,准确率 99。致团队,致每一个不放弃的清晨与深夜。”
小初砚在意识里补充了一句:“还有致一直陪伴的我~”
温楚莹忍不住笑了,“对对对,还有可爱的小初砚,( ̄︶ ̄)”