第457章 成功(1 / 1)

接下来,随着盐浓度提升到03、04,收集到的馏分体积略有增加,颜色也稍明显了些,但依旧远谈不上富集。

直到切换到含05 nacl的缓冲液时,情况发生了变化。

第十一和第十二支试管里接到的液体,明显变得浑浊了一些,呈现出淡淡的乳黄色,体积也比之前多了几毫升。

沈慕言的心跳微微加速。

她小心地将这两支试管的液体合并到一个更干净的小锥形瓶里,标记好。

这是目前看起来最有可能含有目标蛋白的馏分。

后续更高盐浓度的洗脱,收集到的液体又逐渐变得清亮稀少。

洗脱结束,层析柱旁摆了一排标记着不同编号的试管和两个小锥形瓶。

实验最耗时的部分完成了,但最关键的一步还在后面,检测这些馏分中,是否真的含有具有凝血活性的因子viii。

活性测定需要用到经过处理的、缺乏因子viii的血浆和凝血酶原时间测定。

又是一系列精细而容易出错的操作。

老吴主动承担了部分测定工作,他的手法虽然不如沈慕言在某些步骤上那么行云流水,但胜在经验丰富,沉稳老练。

小孙负责准备试剂和记录数据。

沈慕言则统筹全局,同时进行最关键的几个反应步骤的观察和计时。

时间一分一秒过去,检验科里只剩下器皿碰撞的轻响,笔尖划过纸张的沙沙声,以及三人偶尔极低的交流。

“阴性对照,凝固时间超过300秒……”

“阳性对照,凝固时间约45秒……”

“馏分9号……无明显缩短……”

“馏分10号……稍微有点变化?但不明显……”

秒针哒哒走着。

30秒……

40秒……

50秒……

试管中的混合液,原本应该保持液态,此刻,却以肉眼可见的速度,开始变得粘稠,出现极其细微的、正在形成的胶冻状凝块!

“凝固了!”小孙忍不住低呼出声,声音带着压抑不住的激动:“真的凝固了!比阳性对照慢一点,但是……但是真的有效!”

老吴立刻凑过来看,脸上严肃的表情终于裂开一道缝隙,眼镜片后的眼睛里闪过难以置信和一丝激动。

接过沈慕言手中的反应管,轻轻倾斜,观察凝块的牢固程度。

“凝血时间……大约85秒。”他报出数据,声音有些干涩:“活性……虽然远比不上标准品,但确实有!真的有凝血活性!”

沈慕言看着那管中已然凝固的胶状物,又看了看旁边记录本上清晰的数据,胸腔里那颗一直悬着的心,终于沉沉地落回了实处。

一股巨大的、混杂着疲惫、欣慰和激动的情绪涌了上来,让她眼眶微微发热。

他们做到了。

在这简陋到极致的条件下,用陈旧的器材,近乎失效的填料,和有限的血浆样本,真的分离出了具有凝血活性的部分!

纯度虽然肯定不高,产量也微乎其微,但这证明了方向是可行的!

证明了在这戈壁滩的医院里,他们也有能力,为像年年这样的孩子,争取到一丝靠自己双手创造的生机!

“快,把数据整理好!所有馏分的活性测定重复一次,确认结果!”沈慕言迅速压下情绪,声音因为激动而略显沙哑,但条理清晰:“吴老师,我们把11、12合并馏分的蛋白浓度也粗略测一下。孙同志,把实验记录从头到尾再核对一遍,确保没有遗漏和错误。”

无需多言,老吴和小孙立刻投入到后续的确认和整理工作中。

这一次,他们的动作更加迅速,眼神更加专注,连空气中弥漫的试剂味道,似乎都带上了一种成功的喜悦。

接下来的半天,三人几乎废寝忘食,重复测定,计算数据,绘制简单得不能再简单的洗脱曲线和活性分布图。

最终,一份虽然字迹有些匆忙、图表朴素,但数据详实、逻辑清晰的实验报告,在检验科昏黄的灯光下诞生了。

报告重点阐述了利用梯度离心结合离子交换层析,从少量新鲜血浆中成功分离出具有凝血因子viii活性组分的实验过程、关键参数、所得馏分的活性及粗略纯度评估,并附上了初步的优化建议和后续扩大实验面临的困难。

第二天一早,沈慕言和老吴拿着这份还散发着墨水味道的报告,敲响了刘院长办公室的门。

老吴罕见地穿上了他最好的一套、洗得发白的中山装,头发也仔细梳过。

沈慕言则是一身整洁的白大褂,眼神清亮,虽然眼下有着淡淡的青黑,但精神奕奕。

刘院长接过报告,先是被厚度惊了一下,随即戴上老花镜,仔细翻阅起来。

他看得很慢,时而停顿思考,时而用手指划过某一行数据或结论。

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办公室里静悄悄的,只有纸张翻动的沙沙声。

良久,刘院长放下报告,摘下眼镜,揉了揉鼻梁,再抬起头时,脸上是毫不掩饰的震惊和激动。

“好!好!太好了!”他连说了三个好字,手指用力点着报告:“小沈,老吴,你们……你们真的做出来了!虽然活性还低,产量也小,但这证明路子是对的!在我们这么差的条件下,能走出这一步,了不起!太了不起了!”

他站起身,绕过桌子,用力拍了拍沈慕言的肩膀,又向老吴郑重地点了点头:“老吴,这次多亏你支持配合。你们检验科,立了大功!”

老吴一向严肃的脸上,此刻也微微泛红,有些局促地推了推眼镜:“都是沈医生主导,方案也是她拿的,我们就是配合着做。”

“团队协作,缺一不可!”刘院长大手一挥,脸上兴奋的红光还未褪去:“这份报告,我立刻上报师部卫生处!

不,直接上报军区卫生部!这是我们在极端条件下,自力更生解决临床急救难题的宝贵尝试和重大突破!对全军、乃至全国类似条件下的血友病救治,都有重要的参考价值!”

他来回踱了几步,忽然停下,看向沈慕言,眼神灼灼:“小沈,你们下一步有什么打算?需要院里提供什么支持?尽管提!”

沈慕言与老吴对视一眼,上前一步,清晰地说道:“院长,目前的方法还很不成熟,产量和纯度都亟待提高。我们建议,一方面继续优化现有流程,尝试提高回收率。

另一方面,能否请院里帮忙,向上级申请一些更新、效率更高的层析填料?哪怕只有一点点。

还有,稳定的新鲜血浆供应渠道也需要巩固。另外……”

她顿了顿,“关于凝血因子活性的精确测定和制剂的无菌处理,我们也需要更专业的指导和设备。”

她条理分明,既说明了成绩,也毫不避讳困难,提出的需求具体而实际。

刘院长听得连连点头:“好!这些问题,我来协调解决!填料、设备,我去打报告申请!血浆供应,我亲自去跟血站和兄弟单位协调!你们就安心继续研究,需要什么,直接跟我说!”

他顿了顿,目光再次落到那份报告上,语气感慨:“小沈啊,你这次,可真是给咱们医院,也给那孩子,带来了大希望啊!”

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